AcceGen是一家美國生物技術(shù)公司。成立于2016年,位于新澤西州費爾菲爾德,AcceGen提供完整和精確的細(xì)胞產(chǎn)品和科研服務(wù)。AcceGen為客戶開發(fā)了專有的原代細(xì)胞永生化服務(wù)科研服務(wù)。
Caco-2 (人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)分離自一位72歲男性直腸原位癌,人結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞系在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下匯合后,自發(fā)分化為腸上皮樣細(xì)胞,是常用的腸癌細(xì)胞模型。Caco-2細(xì)胞分離自直腸原位癌;當(dāng)長到滿時,Caco-2細(xì)胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細(xì)胞分化。Caco-2細(xì)胞表達(dá)維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白Ⅱ,并呈角質(zhì)蛋白陽性。下面讓我們一起來看看AcceGen人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞Caco-2細(xì)胞的培養(yǎng)要點吧!
1. 細(xì)胞不貼壁怎么辦
Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)基里添加的胎牛血清比例為20%,當(dāng)血清比例降低,貼壁性下降時,補(bǔ)充胎牛血清至20%,繼續(xù)培養(yǎng)1-2天,細(xì)胞即可貼壁。檢查培養(yǎng)基是否偏堿(呈紫紅色),偏堿的培養(yǎng)基可能導(dǎo)致細(xì)胞無法貼壁。
2. 能否用DMEM替代MEM
可以。DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。Caco-2細(xì)胞在DMEM+20%FBS+1%P/S條件下生長狀態(tài)正常。
3. MEM中不含NEAA會怎樣
當(dāng)使用不含NEAA的MEM培養(yǎng)基時,Caco-2生長速度可能下降,漂浮細(xì)胞增多。
4. 細(xì)胞消化不下來怎么辦
如果消化5-10分鐘,細(xì)胞部分脫落,另一部分仍然貼壁緊密,可以將脫落細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管,向原瓶中加入新的胰酶,放入培養(yǎng)箱繼續(xù)消化剩余細(xì)胞,每隔1min拿出來觀察,直到細(xì)胞滑落。
5. 漂浮細(xì)胞多怎么辦
有少量發(fā)亮的細(xì)胞漂浮或黏附在細(xì)胞克隆上,是正常的,隨后會進(jìn)入克隆并正常生長。所以避免頻繁觀察細(xì)胞,可以減少漂浮細(xì)胞產(chǎn)生。
如果Caco-2細(xì)胞隨著培養(yǎng)過程,漂浮得越來越嚴(yán)重,甚至大塊兒飄起,就要檢查培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)環(huán)境是否出現(xiàn)異常了。
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