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培養(yǎng)基制備的注意事項

 更新時間:2024-06-21 點擊量:644
  培養(yǎng)基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關系到檢驗結果的準確性和可靠性,因此對于微生物檢驗而言,培養(yǎng)基的質(zhì)量控制尤為重要。那么你知道培養(yǎng)基制備的注意事項有什么嗎?讓我們一起來看看吧!
  一、配置要求
  正確地制備培養(yǎng)基是進行微生物檢驗的基礎。當實驗人員使用商業(yè)化脫水合成培養(yǎng)基來配制培養(yǎng)基時,應嚴格按照產(chǎn)品說明進行配制,并做好配制記錄。在配制過程中,實驗人員需要遵守相關操作標準,戴上口罩以防吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末。在稱量和溶解培養(yǎng)基時應使用專門的角匙,避免使用金屬制品以防止金屬離子污染培養(yǎng)基,從而影響微生物的生長。在準確稱量后,應首先加入適量的水進行充分溶解,然后再加入所需量的水進行加熱。在加熱過程中,應不斷攪拌以防止培養(yǎng)基在容器底部積聚。調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值后,將其分裝到比培養(yǎng)基體積大20%的容器中,并按照說明進行滅菌處理。對于粉末狀態(tài)的培養(yǎng)基,在開封后應妥善保存在陰涼干燥處,并及時使用,以免受潮、結塊或污染等情況發(fā)生。二、配制用水
  水是制備培養(yǎng)基不可缺一部分,通常使用純化水。此外,還應定期檢查用于配制培養(yǎng)基的水的微生物污染情況,以確保其符合純化水的要求。
  三、滅菌
  滅菌能夠確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標準。在實驗室中,常采用濕熱滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌處理。培養(yǎng)基的滅菌應按照產(chǎn)品使用說明的要求進行操作,并在每次滅菌時放置壓力蒸汽滅菌化學指示卡以驗證滅菌效果。有些培養(yǎng)基可以通過煮沸的方式進行滅菌,例如結晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)基和亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基。實驗人員應及時將培養(yǎng)基從滅菌鍋中取出,并盡快冷卻至所需溫度,以防止加熱過度對實驗數(shù)據(jù)產(chǎn)生影響。在使用培養(yǎng)基前,還需檢查其pH值、色澤和均勻度等指標,以確保符合要求后貼上標簽,并標明名稱、日期、有效期等基本信息。
  四、制備
  在制備平板培養(yǎng)基時,應將經(jīng)滅菌處理的培養(yǎng)基傾注于經(jīng)滅菌處理的干燥平皿中,使其形成至少3mm的厚度。一般來說,直徑為90mm的平皿通常需要加入18~20mL的瓊脂培養(yǎng)基,而需要保存或培養(yǎng)超過48小時的培養(yǎng)基則需要傾注更多的培養(yǎng)基。制備好的培養(yǎng)基應立即使用或儲存,儲存時應標記培養(yǎng)基的名稱和制備日期,并將其密封后放置在2~8℃的冰箱中。而在制備斜面培養(yǎng)基時,應先將培養(yǎng)基分裝到試管中,通常每管加入10mL的培養(yǎng)基,然后進行高壓滅菌。在培養(yǎng)基冷卻凝固前,將試管傾斜一定角度放置,待其冷卻凝固后方可使用和儲存。至于液體培養(yǎng)基,則根據(jù)使用要求直接分裝至三角瓶或試管中,進行滅菌處理后冷卻至室溫,即可直接使用或儲存。
  五、儲存
  驗收入庫的培養(yǎng)基應嚴格按照生產(chǎn)廠家標明的儲存條件、保存期限、使用方法保存和使用。開封后的商品化脫水合成培養(yǎng)基要放置在密閉容器中保存,在瓶身注明s次開封日期。實驗室自制培養(yǎng)基應避光、干燥保存,需冷藏的培養(yǎng)基可放置在2~8℃冰箱中保存,平板保存時間通常為2~4周,瓶裝及試管裝培養(yǎng)基保存時間一般為3~6個月,具體效期應進行驗證。每次使用培養(yǎng)基前,要觀察顏色變化、流動性、均勻性、是否結塊和是否污染等情況。如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基出現(xiàn)受潮、結塊、其他性狀明顯改變的情況,應停止使用。
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